应用程序注释

yy易游体育官网板

在药物开发中，动物测试长期以来对于评估药物效率和安全性至关重要。但是，由于物种差异，将结果转化为人类的道德问题和挑战越来越多地注意到。作为回应，体外模型正在作为可行的替代品，其“微生物生理系统（MPS）”成为了一个紧密模仿人类生理环境的下一代平台的关注。Sumitomo Bakelite Co，Ltd。已将yy易游体育官网Plate商业化，这是由Tokai University Hiroshi Kimura教授开发的芯片泵型多器官MPS。¹此MPS可以实现多个细胞和组织的连接，从而可以在体外繁殖和组织间相互作用并模拟复杂的生物学功能。该应用程序使用yy易游体育官网板呈现肠肝联合培养系统。通过共同培养肠道和肝细胞，该系统比单培养方法更准确地繁殖体内药物滥用和代谢。预计进一步的优化将改善体内条件的复制，并扩大其作为推进药物开发的有力工具的应用。

yy易游体育官网板是一个MPS，其特征是结构，其中两个井通过流通通道连接。可以通过在流通通道内旋转微刺棒来轻松地进行灌注培养。通过结合细胞培养物插入或覆盖片，可以共同培养多达四种不同的细胞类型（图1和2）。

人IPS细胞衍生的肠上皮细胞（F-HISIEC™，Fujifilm Corp）用作肠道细胞，并在细胞培养插入片（Transwell®，Corning）上培养11天。源自人源化肝脏嵌合小鼠（Hepash®，Biopredic International）的肝细胞用作肝细胞，并在盖玻片上培养5天（图4）。

将预培养的F-HISIEC™（在细胞培养插入物上）和Hepash®（在盖玻片上）转移到yy易游体育官网板上，并进行了2天的肠肝培养（图3和4）。使用以2500 rpm的旋转速度设置的搅拌器设备进行灌注培养。作为对照，还进行了肠道和肝细胞的单一培养。

作为模型化合物，（s） - （+） - 硫酸氯吡格雷（以下称为氯吡格雷）。已知该化合物被CES1酶在肝脏中吸收，并将其代谢成不活跃的形式。在本实验中，将药物添加到肠肝培养物和肠道文化的细胞培养插入物（以下称为“内部插入物”）中，以及Wells A和B（以下称为“井中”）用于实时培养物。共同文化开始后的0、1、2、4、6、24和48小时收集培养基样品。使用LC-MS/MS测量氯吡格雷及其代谢物氯吡格雷羧酸的浓度（图4）。

图。 4。实验时间表

共培养（图5A）和肠道培养物（图5B）暴露了插入物内部药物浓度的降低和井中的增加。这些结果表明，类似于肠道培养的共培养可以评估肠道细胞介导的时间依赖性渗透率行为。关于肝脏代谢，在肠肝共培养和实时单位文化中都观察到了井内代谢物浓度的增加（图5C）。代谢物与药物的比率与活形文化中的比率相当（图6），表明肝细胞功能保持在共培养系统中。此外，在肠肝共培养中（图5A），与肝单培养物相比，代谢产物浓度增加了较慢（图5C）。这表明肠道肝共培养系统允许对肠道中的药物滥用的时间依赖性评估，然后是肝脏代谢，因为该药物从插入物渗透到孔中。此外，井A和B中几乎相同的药物浓度（图5A，5B）证实了yy易游体育官网板中的溶液通过灌注均匀混合。

图。 5。氯苯氯氯哥省及其代谢物的浓度在插入物和井中：（a）肠肝共yy易游体育官网，（b）肠单养殖，（c）肝形成

图。 6。氯吡格雷及其代谢物的总量

在这项研究中，我们使用yy易游体育官网板上开发了肠肝共培养系统来评估药物滥用和代谢。使用模型化合物获得的结果表明，该系统反映了药物滥用和代谢，这表明该系统可以更准确地评估体内药物行为与单一文化系统相比。使用yy易游体育官网板增强药物丧失和代谢的体内可重复性的肠道共培养系统，并有望成为支持药物发现的重要工具。向前迈进，我们旨在评估具有各种吸收和代谢谱的药物，并通过将结果与人类临床数据进行比较来优化培养系统。

该研究得到日本医学研发机构（AMED）的支持（赠款号JP17BE0304201，JP22BE1004201）。这项研究是与Sakai实验室（东京大学），Kato Laboratory（Kanazawa University）和Kimura实验室（Tokai University）合作进行的。我们真诚地感谢所有参与的人。

1）Shinha，K，Nihei，W，Nakamura，H。等。 （2021）。MicroMachines 12, 1-152）Kurniawan，DA，Leo，S，Inamatsu，M。等。 （2024）。pnas nexus3, 1-10